技术简介

正常细胞的表面由不对称分布在质膜内叶和外叶上的脂质组成。其中一种脂质，磷脂酰丝氨酸（PS），通常仅分布于质膜的内叶，因此仅暴露于细胞质中。然而，在细胞凋亡过程中，脂质不对称性消失。同时PS暴露在质膜的外部小叶上。 36kDa的钙依赖性的磷脂结合蛋白Annexin V能够与PS结合。因此，荧光标记的Annexin V可用于检测暴露于凋亡细胞外部的PS。Annexin V还可以染坏死细胞，因为这些细胞的膜破裂，使Annexin V可以进入整个质膜，但是Annexin V就无法区分坏细胞死（中晚期凋亡细胞）和早期凋亡细胞。因此，通过与碘化丙啶（PI）共染色，可以将凋亡细胞与坏死细胞（中晚期凋亡细胞）区分开，因为早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整，PI能进入坏死细胞（中晚期凋亡细胞）但是被早期凋亡细胞排除在外。因此可通过Annexin V结合和PI摄取，然后进行流式细胞仪检测来量化凋亡和坏死细胞。

该图为Annexin V结合和PI摄取来测量细胞凋亡的示意图。（A）描述凋亡细胞Annexin V结合和PI摄取。（i）磷脂酰丝氨酸（PS）位于活细胞完整质膜的内部小叶上，这些细胞不会被Annexin V和PI染色。（ii）PS翻转到凋亡细胞质膜的外部小叶，这些细胞在外部结合Annexin V，但仍不被PI染色。（iii）继发性坏死细胞（中晚期凋亡细胞）膜破裂， Annexin V与质膜上的PS结合，PI被吸收并与DNA结合。（B）左图为流式数据的点图示例，右图实际案例。其中，Q1群为坏死细胞群（Annexin V阴性，PI阳性），Q2群为中晚期凋亡细胞群（Annexin V阳性，PI阳性），Q3群为活细胞群（Annexin V阴性，PI阴性），Q4群为早期凋亡细胞群（Annexin V阳性，PI阴性）。

 

Crowley Lisa C,Marfell Brooke J,Scott Adrian P et al. Quantitation of Apoptosis and Necrosis by Annexin V Binding, Propidium Iodide Uptake, and Flow Cytometry.[J] .Cold Spring Harb Protoc, 2016, 2016: undefined.

技术优势

√ 严格的对照和实验质控点，保障结果的准确可信
√ 数据分析作图和英文材料方法，详细的原始数据，为您发表文章保驾护航
√ 已发表的文章案例

服务内容

1.服务流程

2. 服务周期：2～3周
3. 交付内容：
A. 所有实验结果的原始数据
B. 实验报告（含详细的实验步骤，主要仪器和试剂的厂家货号信息）
C. 英文材料方法
4. 客户已发表结果展示

Zhou Junjie,Chen Wenhao,He Qianwen et al. SERBP1 affects the apoptotic level by regulating the expression and alternative splicing of cellular and metabolic process genes in HeLa cells.[J] .PeerJ, 2022, 10: e14084.