过表达质粒构建以PCR为基础获得编码全长蛋白质序列的DNA序列，我们的质粒有以下特点与优势：
- 选择CMV启动子具有较高的表达效率。
- 载体中包含绿色荧光蛋白的表达框，可作为报告基因来检测 DNA 的导入情况，确定转染的条件和监测转染的效率。
- 在C端与3XFlag标签与目的基因融合，方便后期的检测。
OE过表达质粒列表
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如果您选择生命之美，我们免费为您提供配套的阴性对照空载体，并提供可以直接用于转染的质粒。
| 套装组成 | 数 量（个） | |
| 针对目的基因设计的shRNA载体 | 1 | |
| 阴性对照shRNA空载体 | 1 | |
| 注：套装内质粒提供量为 ：质粒1管（5ug/tube）+甘油菌1管 | ||
| 规 格 | 价 格 | 交货周期 |
| 1套 | 咨询 | 现货 |
1、细胞培养及转染
人宫颈癌Hela细胞按照Invitrogen 的转染试剂Lipo2000 说明书要求进行转染，48h后收集样品，提RNA，进行RT-QPCR。
2、实验结果与分析
- 细胞转染48h后使用荧光显微观察GFP荧光表达情况
NC
OE
描述：根据绿色荧光蛋白GFP的表达，可以判断质粒DNA成功导入Hela细胞，转染效率较高。
- 转染48h后，RT-QPCR检测干扰效果
图2 目的基因RT-QPCR 的结果
描述：转染48h后与空载体NC相比较，目的基因mRNA的相对表达水平显著升高。
- Western blot 检测蛋白的表达水平
图3：目标基因蛋白表达水平，使用与目的蛋白融合的标签蛋白FLAG抗体进行检测
描述：转染48h后，使用WB结果显示目的蛋白有表达。
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