NK 细胞的身份和「油门 / 刹车」都写在表面受体上:CD56 与 CD16 分亚群,CD226 / NKp30 / NKp44 / NKp46 / NKG2D 是活化受体,KIR 家族与 Siglec-9 是抑制受体,CD49a / CX3CR1 判断是否驻留组织。30 个标记一次测完,和转录组在同细胞上对齐。
NK 细胞不用预先致敏就能杀伤靶细胞,是肿瘤免疫、感染免疫和 CAR-NK 治疗里的核心角色。它「杀不杀」取决于活化受体与抑制受体的力量对比,而这两类受体都是表面蛋白——mRNA 层面经常读不出差别,蛋白层面一目了然。
这款 Panel 的 30 个标记按「谱系 / 亚群—活化受体—抑制受体—迁移与驻留—发育与基质互作」五类组织,同时保留了 CD3 用来排除 T 细胞(CD3⁻ 才是真 NK),避免把 NKT、γδT 混进 NK 群里。
| 产品全名 | BD® OMICS-One NK-Cell Protein Panel(货号 572434) |
| 标记数 | 30 种预滴定抗体-寡核苷酸(单管冻干) |
| 规格 / 染色量 | 冻干粉,2 tests/包装;单次可染多达 200 万个细胞 |
| SMART 滴定靶标 | CD2、CD31(PECAM-1) |
| 适用物种 | 人(Human,官方标注 Tested in Development) |
| 兼容检测 | BD Rhapsody™ 单细胞 RNA 检测(WTA / 靶向 mRNA)、BD® 单细胞多重检测试剂盒(SMK);可与其他 OMICS-One Panel 组合,也可从 470+ 种单瓶 AbSeq 抗体中 drop-in |
| 储存 | 2–8 ℃ 避光保存,不可冷冻;复溶后立即用于染色 |
| 复溶 | 取出冻干粉室温平衡 5 min → 加 35 μL 无核酸酶水 → 室温静置 5 min → 置冰上待用 |
30 种特异性抗体全部来自 BD 官方 Panel Content 表,克隆号一并列出。带 * 号的是 SMART 滴定靶标。
| 标志物 | 克隆 | 主要标记 / 用途 |
|---|---|---|
| CD2 * | RPA-2.10 | NK / T 共受体(SMART) |
| CD3 | UCHT1 | 排除 T 细胞(真 NK 为 CD3⁻) |
| CD11b | M1/70 | 成熟度 / 黏附 |
| CD16 | 3G8 | CD56dim 亚群 / ADCC |
| CD27 | M-T271 | 早期 / 记忆样 NK |
| CD31(PECAM-1)* | WM59 | 迁移 / 血管互作(SMART) |
| CD38 | HIT2 | 活化 |
| CD49a(Integrin α1) | SR84 | 组织驻留 |
| CD49d(Integrin α4) | 9F10 | 归巢 / 黏附 |
| CD54(ICAM-1) | HA58 | 黏附 / 免疫突触 |
| CD56(NCAM) | NCAM16.2 | NK 谱系(bright / dim) |
| CD63 | H5C6 | 脱颗粒 / 活化 |
| CD94(NKG2 家族) | HP-3D9 | 抑制 / NKG2 复合体 |
| CD96 | 6F9 | 活化 / 黏附 |
| CD106(VCAM-1) | 51-10C9 | 内皮互作 / 迁移 |
| CD122(IL-2Rβ) | Mik-β3 | IL-2 / IL-15 信号 |
| CD140a(PDGFRα) | αR1 | 基质成分 |
| CD140b(PDGFRβ) | 28D4 | 基质成分 |
| CD158b1, b2, j(KIR2DL2/2DL3/2DS2) | DX27 | 抑制性 KIR |
| CD158e1(KIR3DL1 / NKB1) | DX9 | 抑制性 KIR |
| CD161(KLRB1) | HP-3G10 | NK 亚群 / 抑制 |
| CD184(CXCR4) | 12G5 | 骨髓归巢 |
| CD226(DNAM-1) | DX11 | 活化受体 |
| CD248(Endosialin) | B1/35 | 基质成分 |
| CD314(NKG2D) | 1D11 | 活化受体 |
| CD329(Siglec-9) | E10-286 | 抑制性受体 |
| CD335(NKp46) | 9E2/NKp46 | 活化受体 |
| CD336(NKp44) | p44-8 | 活化受体 |
| CD337(NKp30) | P30-15 | 活化受体 |
| CX3CR1 | 2A9-1 | 迁移 / 组织驻留 |
* CD2、CD31 为 SMART 滴定靶标。
NK 研究的核心问题是「这是哪一群」和「它现在是杀还是观望」,30 个标记载两组信息:
CD56 + CD16 先把两大亚群分开:CD56bright CD16⁻ 以分泌细胞因子为主,CD56dim CD16⁺ 以 ADCC 杀伤为主。
CD11b 与 CD27 组合可以排出 NK 细胞的成熟阶段(CD11b⁻CD27⁺ → 双阳 → CD11b⁺CD27⁻)。
CD226(DNAM-1)、CD335(NKp46)、CD336(NKp44)、CD337(NKp30)、CD314(NKG2D)、CD96——判断「油门」踩得多重。
CD158b1/b2/j 与 CD158e1(KIR 家族)、CD329(Siglec-9)、CD94、CD161——判断「刹车」是否被激活。
CD49a 与 CX3CR1 是组织驻留 NK 的常用标记,CD31、CD63、CD106、CD184 反映迁移与内皮互作。
CD122(IL-2Rβ)反映 IL-2 / IL-15 信号,CD140a / CD140b / CD248 同时把样本里的基质成分标出来,方便剔除。
官方对这款 Panel 做了逐标记性能验证:在含 NK 细胞的样本上确认 30 种抗体-寡核苷酸都能特异识别各自靶标,并且各标记的检测性能针对不同细胞类型做过优化,不因多标记共管而互相干扰。
* 数据来源:BD 官方 NK-Cell Protein Panel 产品页与产品单页。
NK Panel 选 CD2 和 CD31 做 SMART 滴定。这两个标记在 NK 与 T 细胞上表达量高,容易吃掉大量读长;SMART 设计压低它们的信号占用,把读长让给 CD226、CD329、CD335 / 336 / 337 这类决定功能的受体。官方验证 CD2 与 CD31 的检出不受影响,低表达标记的分辨率提升。
看浸润 NK 的活化 / 抑制受体比例,判断是否被肿瘤「劝退」;常与免疫治疗响应一起分析。
输注前后产品的亚群构成(CD56bright / dim)、活化受体表达与耗竭倾向。
病毒感染后 NK 如何动员、哪些活化受体在起作用,CD38 / CD63 反映活化与脱颗粒。
靠 CD49a、CX3CR1、CD69 类标记(本 Panel 含前两个)判断 NK 是血液巡逻还是已驻扎组织,肝脏、子宫、黏膜研究常用。
CD11b / CD27 / CD122 组合排成熟阶段,研究 NK 细胞发育与重建。
造血干细胞移植后 NK 重建的早晚与受体谱恢复情况。
* 本 Panel 不含 CD57、NKG2A(CD159a)、CD274(PD-L1)等标记;NK 耗竭 / 检查点课题建议从 470+ 种单抗体目录补标记,或先用 IDP 泛免疫 Panel 看全景再决定。
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